![]() |
|
[badania naukowe] #1 raport #2 - Wersja do druku +- Forum Republiki Bialeńskiej (https://vonthorn.sarmacja.org/galeria/archive/bialenia/spolecznosc) +-- Dział: Organy i instytucje państwowe (https://vonthorn.sarmacja.org/galeria/archive/bialenia/spolecznosc/forum-9.html) +--- Dział: Uniwersytet Bialeński (https://vonthorn.sarmacja.org/galeria/archive/bialenia/spolecznosc/forum-133.html) +---- Dział: Wydział Nauk Ścisłych (https://vonthorn.sarmacja.org/galeria/archive/bialenia/spolecznosc/forum-147.html) +----- Dział: Katedra Nauk Przyrodniczych (https://vonthorn.sarmacja.org/galeria/archive/bialenia/spolecznosc/forum-187.html) +----- Wątek: [badania naukowe] #1 raport #2 (/thread-8690.html) |
[badania naukowe] #1 raport #2 - Mateusz Adam Sartoneskorsi - 30.12.2017 ![]() Raport naukowy #2
Republika Bialeńska, dn. 30.12.2017
Pobrane próbki krwi poddano denaturacji termicznej, a następnie po dodaniu silnego detergentu SDS wyizolowano kwasy nukleinowe z leukocytów i monocytów za pomocą etanolu. Wyizolowane kwasy przechowywano w chłodziarce przez 24 h, po czym poddano je powielaniu metodą PCR - wykorzystując termocykler. Schemat powielania metodą PCR został przedstawiony na schemacie 1. ![]() Schemat 1. Powielanie DNA za pomocą metody PCR.
Powielone kwasy nukleinowe poddano działaniu enzymów restrykcyjnych, które tną nici kwasów pomiędzy nukleotydami zawierającymi adeninę i guaninę (AG). W ten sposób metodą elektroforetyczną wyizolowano konkretny fragment DNA odpowiedzialny za kodowanie białka, odpowiedzialnego za autoagresje. W elektroforezie do rozdziału wykorzystywano chromatografię cieczową (jej rodzaj). W wyniku tej analizy z próbek krwi osób zdrowych uzyskano chromatogram 1, a w wyniku analizy próbek krwi osób zdrowych i osób zdrowych o krwi 0 Rh - uzyskano chromatogram 2.
![]() ![]() Chromatogram 1. Chromatogram 2. Jak widać na chromatogramie 1. nie występuję sygnał, który pojawił się w chromatogramie 2 o czasie retencji 46 s (zredukowanym 28 s). Zebrano frakcje rozciętych kwasów które eluowały w 39 s oraz 46 s. Zebrane frakcję powielono metodą PCR, jak wcześniej w celu zwiększenia ich ilości do analizy. Po powieleniu zbadano absorpcję zebranych fragmentów kwasów ich uśrednione wyniki ukazano na wykresie 1. ![]() Wykres 1. Wykres absorbancji zebranych fragmentów kwasów nukleinowych.
W wyniku analizy spektrofotometrycznej można powiedzieć że fragment II bardziej absorbuje promieniowanie w zakresie 380-420 nm (posiada dwa maksima) natomiast fragment I kwasów nukleinowych ma mniejsze lecz szerokie maksimum w zakresie dalszego UV.
W wyniku badań wykazano, że sekwencją nukleotydów, która powoduje kodowanie białka odpowiedzialnego za autoagresję jest sekwencja fragmentu II wyizolowanych kwasów nukleinowych. Z uwagi na charakterystyczne pasmo absorpcji (2 maksima) można bez cięcia, a jedynie po wynikach badań spektrofotometrycznych rozpoznać, wykluczyć obecność nici kodujących owe białko.
![]() |